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細(xì)胞系轉(zhuǎn)染

細(xì)胞系可以用 Celetrix 電穿孔以非常高的效率和非常高的細(xì)胞活力進(jìn)行轉(zhuǎn)染。例如，Jurkat 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率可達(dá) 90% 以上，細(xì)胞保持快速生長。

原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染

Celetrix 電穿孔技術(shù)可以以非常高的效率對(duì)原代細(xì)胞進(jìn)行電穿孔。例如，人PBMC用GFP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率為64%，CAR-T2A-GFP用SB轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)染效率可達(dá)60-90%。 人iPSC電穿孔效率可達(dá)80%以上，細(xì)胞保持未分化。與市場(chǎng)上的所有其他電穿孔方法相比，Celetrix 的效率高。

Celetrix TM密封管

1. 毛細(xì)管電穿孔的局限性

毛細(xì)管壁是絕緣體。當(dāng)細(xì)胞非?？拷?xì)血管壁時(shí)，細(xì)胞和毛細(xì)血管壁之間就會(huì)形成一條狹窄的通道，供電流通過。由于液體電阻與橫截面積成反比，因此為該狹窄通道分配了更高的電壓。細(xì)胞上的有效電穿孔表面也增加了。毛細(xì)管效應(yīng) (CE) 可以在非毛細(xì)管溶液中通過將細(xì)胞置于高濃度下類似地實(shí)現(xiàn)，從而使它們成為彼此的下一個(gè)絕緣體。

毛細(xì)管效應(yīng)對(duì)細(xì)胞與毛細(xì)管壁之間的距離非常敏感。當(dāng)細(xì)胞非常靠近毛細(xì)血管壁 (   ) 時(shí)，毛細(xì)管效應(yīng) (CE) 非常強(qiáng)，該細(xì)胞需要較低的脈沖電壓。隨著細(xì)胞與壁距離的增加 (  )，毛細(xì)管效應(yīng)迅速減弱，該細(xì)胞需要更高的脈沖電壓。當(dāng)細(xì)胞放置在距毛細(xì)管壁大約兩個(gè)細(xì)胞直徑的距離 (  ) 時(shí)，毛細(xì)管效應(yīng)幾乎為零，并且該細(xì)胞需要更高的電壓。

由于毛細(xì)管中的所有細(xì)胞都經(jīng)歷來自脈沖發(fā)生器的相同電壓脈沖，因此脈沖不可能同樣適用于細(xì)胞的所有三個(gè)區(qū)域。因此，毛細(xì)作用機(jī)制本質(zhì)上是有限的。

毛細(xì)管電泳的局限性：

1）幫助是局部的和不平等的，本質(zhì)上不適合高效率；

2) 氣泡未壓縮，電流擾動(dòng)和飛??；

3）體積小，使用大容量細(xì)胞樣品不方便，成本高；

4) 低功率脈沖發(fā)生器，不可擴(kuò)展。

2. CeletrixTM 密封管

1>. 用于高效電穿孔的均勻電場(chǎng)。

2>。沒有比色皿或毛細(xì)管的限制。

3>。樣品體積從小20ul到大800ul的選擇。

4>?？焖偾医?jīng)濟(jì)高效地處理大樣品。

5>。精度和再現(xiàn)性。

三、CeletrixTM管的優(yōu)點(diǎn)

mRNA超高效電穿孔

許多免疫和研究應(yīng)用需要轉(zhuǎn)染 mRNA。Celetrix 電穿孔技術(shù)可以非常高效地對(duì) mRNA 進(jìn)行電穿孔。

mRNA的轉(zhuǎn)染率通常高于質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染率。例如，GFP mRNA 可以以 97.5% 的超高效率電穿孔到 Jurkat 細(xì)胞。

細(xì)胞中mRNA表達(dá)蛋白的水平比質(zhì)粒表達(dá)的蛋白更均勻。然而，mRNA的蛋白質(zhì)表達(dá)水平通常低于強(qiáng)質(zhì)粒。Celetrix 電穿孔可以幫助實(shí)現(xiàn)相對(duì)較高的蛋白質(zhì)表達(dá)水平和較長的表達(dá)時(shí)間。

siRNA 電泳比 mRNA 更容易。通常很容易實(shí)現(xiàn)接近 100% 的 siRNA 電穿孔，但蛋白質(zhì)敲低水平是一個(gè)不同的生物學(xué)問題，它可能會(huì)根據(jù) siRNA 選擇而有所不同。

此外，mRNA 的轉(zhuǎn)染將有助于一些特殊細(xì)胞，例如在質(zhì)粒電穿孔后往往會(huì)死亡的巨噬細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞系，而不是 mRNA 電穿孔。例如，BFP mRNA 可以以 98.31% 的超高效率電穿孔至 THP-1 細(xì)胞，并且?guī)缀鯖]有細(xì)胞死亡。

Celetrix 優(yōu)勢(shì)

1、 創(chuàng)造性地將所有哺乳動(dòng)物細(xì)胞類型分為兩組，每組只需微調(diào)電壓。操作極其簡單；

2、高效率和細(xì)胞活力，即使是大質(zhì)粒；

3、低成本：

 A.低成本套件；

 B.通用試劑盒，無需為不同的細(xì)胞備貨；

 C. 實(shí)驗(yàn)順利，使用的試劑盒較少。

4、誠信理念，*“直接轉(zhuǎn)染細(xì)胞核"、“不同細(xì)胞緩沖液"之類的騙局。快速的技術(shù)支持解決用戶的電穿孔問題。

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